Warum verwenden wir Nitrozellulose im Western Blot?

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Warum verwenden wir Nitrozellulose im Western Blot?
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Anonim

Nitrozellulosemembranen sind eine beliebte Matrix, die beim Protein-Blotting verwendet wird wegen ihrer hohen Proteinbindungsaffinität, Kompatibilität mit einer Vielzahl von Nachweismethoden (Chemilumineszenz, chromogen und Fluoreszenz), und die Fähigkeit, Proteine, Glykoproteine oder Nukleinsäuren zu immobilisieren.

Warum verwenden wir Nitrozellulose?

Ein Nitrozellulose-Objektträger, eine Nitrozellulosemembran oder ein Nitrozellulosepapier ist eine klebrige Membran, die zur Immobilisierung von Nukleinsäuren in Southern Blots und Northern Blots verwendet wird Sie wird auch zur Immobilisierung von Proteinen in Western verwendet Blots und Rasterkraftmikroskopie für seine unspezifische Affinität zu Aminosäuren.

Warum wird PVDF beim Western Blot verwendet?

Western Blotting mit Polyvinylidendifluorid (PVDF)-Membranen ist eine der beliebtesten Techniken zum Nachweis und zur Charakterisierung von Proteinen. Wird diese Technik mit einer Immundetektion kombiniert, kann das Verh alten eines bestimmten Proteins aufgeklärt werden.

Ist die Nitrozellulosemembran hydrophob?

Im Gegensatz zu Polyacrylamid bietet Nitrocellulose einen geeigneten Träger für die anschließende Proteinfärbung oder immunchemische Charakterisierung. Die Bindung an Nitrozellulose wird überwiegend durch hydrophobe Wechselwirkung vermittelt (Schneider, 1980), obwohl auch elektrostatische Kräfte beteiligt sein können (Farrah et al., 1981.

Was ist besser Nitrozellulose oder PVDF?

Während Nitrozellulose spröde und zerbrechlich ist, ist PVDF h altbarer und hat eine höhere chemische Beständigkeit, was es ideal für Resonding- und Sequenzierungsanwendungen macht. Es kann sich als schwierig erweisen, Nitrozellulose zu entfernen und erneut zu untersuchen, ohne das Signal zu verlieren.

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