Warum Verschiebung der Retentionszeit in HPLC?

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Warum Verschiebung der Retentionszeit in HPLC?
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Video: Warum Verschiebung der Retentionszeit in HPLC?

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Video: Bestimmung der Peakfläche aus einem HPLC-Chromatogramm 2024, Dezember
Anonim

Im Zusammenhang mit dem letzten Phänomen stehen Verschiebungen der Retentionszeiten, die durch eine Erhöhung des Gegendrucks in der Säule verursacht werden. Steigender Gegendruck kann auf eine Verschmutzung der Säule hindeuten, aber selbst eine verstopfte Fritte kann die Retentionszeiten beeinflussen.

Was verursacht eine Verschiebung der Retentionszeit?

Eine der häufigsten Ursachen für Verschiebungen der Retentionszeit bei Umkehrphasen-LC-Trennungen ist eine geringfügige Änderung der Konzentration des organischen Lösungsmittels, normalerweise Methanol oder Acetonitril Dies kann durch einen geringfügigen Formulierungsfehler oder eine Änderung in der Zusammensetzung der mobilen Phase passieren, wenn ein Lösungsmittel im Laufe der Zeit verdunstet.

Was erhöht die Verweildauer?

Bei ähnlicher Polarität von stationärer Phase und Verbindung verlängert sich die Retentionszeit, da die Verbindung stärker mit der stationären Phase wechselwirkt. Folglich haben polare Verbindungen bei gleicher Temperatur lange Retentionszeiten auf polaren stationären Phasen und kürzere Retentionszeiten auf unpolaren Säulen.

Welche Faktoren beeinflussen die Verweildauer?

Die Retentionszeit hängt von vielen Faktoren ab: Analysebedingungen, Art der Säule, Säulenabmessung, Degradation der Säule, Vorhandensein aktiver Punkte wie Kontamination. usw. Wenn Sie ein bekanntes Beispiel anführen, erscheinen alle Peaks zu kürzeren Zeiten, wenn Sie einen Teil der Säule abschneiden.

Was beeinflusst die Retentionszeit in der Chromatographie?

Eine Änderung des Temperaturprogramms bewirkt oft eine Retentionszeitverschiebung aller Peaks. Eine Änderung der Anfangstemperatur, der anfänglichen H altezeit oder der Rampenrate kann alle Peaks beeinflussen. Die Retentionszeiten verlängern sich mit einer niedrigeren Anfangstemperatur, einer längeren anfänglichen H altezeit oder einer langsameren Rampenrate.

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