Vortexing schert Ihre RNA nicht, um sie unbrauchbar zu machen, wenn Sie Random Priming RT durchführen - nur wenn Sie lange mRNA klonieren möchten. Der technische Support von Invitrogen ist ebenfalls korrekt. Chloroform ist schwerer als Trizol und sinkt auf den Boden des Röhrchens.
Ist es sicher, RNA zu verwirbeln?
Trizol-Lysate oder RNA-Proben nicht vortexen, um ein Scheren zu vermeiden. Bewahren Sie die RNA-Proben nach der Extraktion immer auf Eis auf. Dieses Protokoll ist für lysierte Proben von 1 ml Trizol in einem 1,5- oder 2-ml-Röhrchen konzipiert.
Kann man RNA erhitzen?
Vermeiden Sie daher hohe Temperaturen ( über +65°C), da diese die Integrität der RNA beeinträchtigen. Um Sekundärstrukturen auszuschmelzen, erhitzen Sie die RNA stattdessen für 15 Minuten auf +65 °C in Gegenwart von denaturierenden Puffern.
Wie resuspendiert man RNA-Pellets?
resuspendieren Sie Ihr Pellet mit warmem Wasser (40-50 Grad Celsius). bei 45 Grad Celsius für 10 Minuten inkubieren. setzen Sie sie in +4 für 4-6 Stunden.
Wie präzipitiert man RNA?
A.
Nachdem die Salzkonzentration eingestellt wurde, kann die RNA ausgefällt werden, indem 2,5 Volumen Ethanol oder 1 Volumen Isopropanol hinzugefügt und gründlich gemischt werden, anschließendes Abkühlen für mindestens 15 Minuten bei -20° C.
